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3.加蓋,并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓,使螺栓松緊一致,勿使漏氣。
4.用電爐或煤氣加熱,并同時打開排氣閥,使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣。待冷空氣完全排盡后,關上排氣閥,讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時,控制熱源,維持壓力至所需時間。本實驗用 1.05kg/cm2,121.3℃,20分鐘滅菌。
5.滅菌所需時間到后,切斷電源或關閉煤氣,讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降,當壓力表的壓力降至0時,打開排氣閥,旋松螺栓,打開蓋子,取出滅菌物品。如果壓力未降到0時,打開排氣閥,就會因鍋內(nèi)壓力突然下降,使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口,造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。
6.將取出的滅菌培養(yǎng)基放入 37℃溫箱培養(yǎng)24小時,經(jīng)檢查若無雜菌生長,即可待用。
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